Validación de un método analítico para la valoración de clorhidrato de terbinafina en gel 1% por cromatografía líquida de alta performance (H.P.L.C.)

Abstract

El objeto del presente trabajo de investigación fue demostrar la validez del método analítico propuesto. El método se basa en la separación y cuantificación del principio activo por cromatografía líquida de alta performance en fase reversa, a través de una columna cromatográfica C18 (125 mm x 4,0 mm x 5 um), a una longitud de onda de 260 nm, empleando una fase móvil compuesta por metanol, buffer pH 3,0 y acetonitrilo con una velocidad de flujo de 1,5 mL/min, y un volumen de inyección de 50 uL. Los valores de desviación estándar relativa obtenidos, 0,926% para repetibilidad y 0,940% para precisión intermedia, demuestran la precisión del método analítico donde el valor máximo permitido es de 2,68% y 4% respectivamente. Para la exactitud se obtuvo una media de recuperación de 100,411%. Al aplicar el test de student se obtuvo un t experimental (-0,602) que es menor al t de las tablas (4,303); por lo tanto no existe diferencia significativa entre la recuperación media y la cantidad añadida del analito. El límite de detección y cuantificación, fue de 0,20 ppm y 0,50 ppm respectivamente. Se demostró la especificidad del método analítico al evaluar de manera inequívoca al analito, Clorhidrato de Terbinafina, donde no se observó interferencia de los excipientes o productos de degradación del principio activo. Para la linealidad se obtuvo como coeficiente de correlación r = 0,99989 siendo el valor mínimo permisible 0,99 y el coeficiente de los factores de respuesta fue de 0,796%, siendo el mínimo permisible 2,0%. Los resultados de los parámetros evaluados se sometieron a pruebas estadísticas y de observación comparándolos con estándares establecidos internacionalmente. Se concluye que el método analítico para la valoración de Clorhidrato de Terbinafina en gel 1% por Cromatografía Líquida de Alta Performance (H.P.L.C.) cumple con la prueba de validación realizada

The purpose of this research was to demonstrate shows the validity of the same, developing established settings and showing the reliability of the method. The method is based in the detachment and quantification of the active principle for liquid chromatography of high performance in a reverse phase through the chromatographic column C18 (125 mm x 4, 0 mm x 5 um), to a wave length of 206 mm employing a mobile phase made up of methanol, buffer pH 3,0 y Acetonitrilo with a flow velocity of 1,5 mL/min and a injection bulk of 50 L. The values of relative standard deviation obtained 0,926 % for repetibility and 0,940 % for intermediate accuracy, they show the analytical method accuracy where the maximum value allowed is 2.68 % and 4,0 % respectively. For the accuracy was obtained a recovery average of 100,411 %.To applied the student test was obtained an experimental t (-0.602) that is smaller than t of the tables (4.303) so there isn't a main difference between average recovery and the quantity added of analyte. The limit of detection and quantification was 0.20 ppm and 0.50 ppm respectively. Also was showed the specificity of analytical method to evaluated of wrong way the analyte, Terbinafine Hydrochloride, where there weren't interferences of excipients or degradation products of active principle. For the linearity was obtained a correlation coefficient r=0.99989 being the same permissible value of 0.99 and the correlation factors answer was 0,796 % being the minimum value 2.0 %. The results of this settings were prove with statistical tests showing that analytical technique proposed for the quantification of the active principle is valid